安全性薬理試験及び毒性試験

安全性薬理試験

1.心血管系への影響（ヒト）（外国人データ）^49）

QT/QTc評価（TQT）試験で、QTcFに及ぼす、健康成人を対象にフェンフルラミンを治療量（26mg/日）及び治療量を超える用量（104mg/日）で反復経口投与したときのフェンフルラミンの影響を評価した。試験結果から、治療量及び治療量を超える用量の反復投与によるQTcFの延長は認められなかった。また、フェンフルラミン及びノルフェンフルラミンの曝露量とQTcFとの間の関連も認められなかった。

2.体重変化（ヒト）^49）

日本人を含めた国際共同第Ⅲ相臨床試験（試験3）で体重がベースラインの7%以上減少した日本人患者は、フェンフルラミン0.7mg/kg/日群で6例中2例、体重がベースラインの7%以上増加した日本人患者はプラセボ群で5例中1例であった。
国内第Ⅲ相非盲検継続試験（1503試験）でベースライン後の来院時に体重がベースラインから7%以上変化した患者は13例中5例（38.5%）であった。
全体として、非盲検継続投与期の体重の変化率は−11.73%（体重減少）～9.52%（体重増加）の範囲であった。体重がベースラインの7%以上増加した患者は2例（15.4%）、ベースラインの7%以上減少した患者は3例（23.1%）であった。中間データカットオフ前の非盲検継続試験期間の最終来院時点で体重減少は未回復であった。

3.中枢神経系・心血管系・呼吸器系・消化管及び泌尿生殖器系に及ぼす影響^49）

①中枢神経系に及ぼす影響（ラット、ヒト)

＊投与量（mg/kg/日）

＊投与量（mg/kg/日）

④消化管及び泌尿生殖器系に及ぼす影響

毒性試験

1.単回投与毒性試験（ラット、イヌ）^50）

本剤を用いた単回投与毒性試験は実施せず、ラット及びイヌを用いた3日間反復経口投与（1日1回）による薬物動態試験、並びにイヌを用いた43週間反復経口投与毒性試験において、本剤の急性毒性及び概略の致死量を評価した。

2.反復投与毒性試験（ラット、イヌ）^51）

3.遺伝毒性試験^52）

1. ①細菌を用いた復帰突然変異試験（in vitro）
   ネズミチフス菌株TA98、TA100、TA1535及びTA1537、並びに大腸菌株WP2uvrAを用い、代謝活性化系の存在下及び非存在下で変異原性の評価を行った結果、フェンフルラミンは変異原性を示さなかった。
2. ②ラット骨髄における小核試験及び肝臓を用いたコメットアッセイのコンビネーション試験（in vivo）
   フェンフルラミンをSDラットに0（溶媒）、15.1、30.2及び60.5mg/kgの用量で強制経口投与した。60.5mg/kg/日は用量設定試験から最大耐量と判断した。その結果、フェンフルラミンは染色体損傷又はDNA損傷を誘発しなかった。

4.がん原性試験（マウス、ラット）^53）

1. ①マウスを用いた試験（短期試験）
   CByB6F1/Tg rasH2ヘミ接合型（トランスジェニック）マウスに51.8mg/kg/日までの用量で6ヵ月間投与した試験（5群、雌雄各n=25／群）では、いずれの投与量でもフェンフルラミン投与に関連する発がん性は認められなかった。
   投与量51.8mg/kg/日での雌雄平均化したAUC_0-tは、フェンフルラミンについてはヒト曝露量（0.7mg/kg/日投与時）の約17倍、ノルフェンフルラミンについては約23倍であった。同様に、投与量51.8mg/kg/日での雌雄平均化したC_maxは、フェンフルラミンについてはヒト曝露量（0.7mg/kg/日投与時）の約38倍、ノルフェンフルラミンについては約28倍であった。
2. ②ラットを用いた試験（長期試験）
   SDラットに6.9mg/kg/日までの用量で2年間投与した試験（4群、雌雄各n=60／群）において、いずれの投与量でもフェンフルラミン投与に関連する発がん性は認められなかった。
   この試験における高用量6.9mg/kg/日での雌雄平均化したAUC_0-tは、フェンフルラミンについてヒト曝露量（0.7mg/kg/日投与時）は約5倍、ノルフェンフルラミンについては約11倍であった。同様に、高用量6.9mg/kg/日での雌雄平均化したC_maxは、フェンフルラミンについてはヒト曝露量（0.7mg/kg/日投与時）の約7倍、ノルフェンフルラミンについては約14倍であった。

5.生殖発生毒性試験^54）

1. ①生殖発生毒性試験
   
   • 1-1：受胎能及び初期胚発生試験（ラット）
     SDラットに1日1回、0～17.3mg/kg/日フェンフルラミンを経口投与したところ、17.3mg/kg/日で受胎率の低下が認められたが、雄では不妊との直接的な関連は認められなかった。
     雌でも子宮又は卵巣のその他の変化はみられず、胎盤又は性周期に対するフェンフルラミンの影響は認められなかった。
     なお、生存胚及び着床数の減少、並びに着床前胚損失率及び着床後胚損失率の増加は、交配前期間及び妊娠初期双方の大幅な体重減少として実質的な母体毒性を伴う用量で認められた。
     当試験の無毒性量は雄の交配及び受胎能に対する無毒性量は6.9mg/kg/日、雌の交配、受胎能、初期胚発生に対する無毒性量は3.0mg/kg/日であった。
   • 1-2：胚・胎児発生試験（ラット、ウサギ）
     SDラット母動物の妊娠6～17日に1日1回フェンフルラミンを経口投与し、肺・胎児発生に関する試験を行った。SDラットの母体毒性は、フェンフルラミン8.6mg/kg/日以上で摂餌量減少及び体重増加減少又は体重減少が認められた。発生毒性は、フェンフルラミン34.6mg/kg/日投与で奇形の増加が認められ、胎児体重の減少、後肢回転異常及び口蓋裂の発生率上昇と関連した。
     ラットの試験では母動物及び胎児に対する無毒性量は8.6mg/kg/日であった。
     NZWウサギ母動物の妊娠7～19日に1日1回フェンフルラミンを経口投与し、肺・胎児発生に関する試験を行った。NZWウサギの母体毒性は、散瞳がフェンフルラミン8.6mg/kg/日（ウサギ3匹に16回）及び13.0mg/kg/日（ウサギ12匹に40回）投与で認められ、呼吸数増加が13.0mg/kg/日投与でのみ認められた。母動物の摂餌量及び体重はすべての用量（4.3～13.0mg/kg/日）で減少した。発生毒性は、すべての投与量で着床後胚損失率及び吸収胚の増加が認められた。
     ウサギの試験では、母動物に対する無毒性量は13.0mg/kg/日と推定されたが、再評価により母動物に対する無毒性量は4.3mg/kg/日未満が推奨された。
   • 1-3：出生前及び出生後の発生並びに母体の機能に関する試験（ラット）
     SDラット母動物の妊娠6日～分娩後20日又は妊娠24日に1日1回フェンフルラミンを経口投与し、出生前及び出生後の発生並びに母体の機能に関する試験を行った。SDラット母動物の一般毒性は、フェンフルラミン34.6mg/kg/日群の妊娠期間及び授乳期間中に認められた。体重の減少は、妊娠期間中すべての用量で認められた。
     出生児毒性は、分娩後4日までにフェンフルラミン34.6mg/kg/日群のすべての出生児が死亡した。出生児の平面正向反射は4.3及び8.6mg/kg/日投与、走地性は8.6mg/kg/日投与でフェンフルラミンによる影響を受けた。分娩後3日から7日で平面正向反射の基準を達成した出生児の割合が減少したが、分娩後9日以降では対照群と同様であった。負の走地性の基準を達成した出生児の割合減少は分娩後9日にのみ認められたが、その後は対照群と同様であった。
2. ②幼若動物を用いた毒性試験（ラット）
   生後7日目の幼若SDラットに、生後76日目までフェンフルラミンを経口投与後、4週間の回復性試験を行った。投与期間中に認められた変化は、7.8及び17.3mg/kg/日群で投与期間早期に中枢神経系に関連した一般状態所見の発現率増加（振戦、協調運動障害、歩行異常、立毛、脱水、反応性亢進、過敏症、被毛の身づくろい消失、活動性低下）、7.8及び17.3mg/kg/日群で摂餌量及び体重増加量の低値であった。回復試験後、フェンフルラミン投与に関連した行動変化は消失し、回復性が認められた。また、性成熟に影響は認められず、性周期、交配及び受胎率又は子宮及び卵巣パラメータへの影響は認められなかった。
   幼若ラットの試験では、無毒性量は7.8mg/kg/日と推定された。

6.局所刺激性試験（ラット、イヌ）^55）

フェンフルラミンの経口／胃腸管刺激は、ラット及びイヌを用いた反復投与毒性試験で評価しており、ラット及びイヌを用いた13、26及び43週間経口投与毒性試験又はマウス及びラットを用いたがん原性試験では、投与に関連した肉眼的又は顕微鏡的に病理学的所見は認められなかった。GLPに適合した幼若ラットを用いた毒性試験でも、経口／胃腸管の局所有害作用のエビデンスは認められなかった。

7.その他の毒性試験

1. ①免疫毒性^56）

   56）日本新薬株式会社 社内資料（承認時評価資料）：
   免疫毒性試験

   げっ歯類及び非げっ歯類の動物にフェンフルラミンを反復経口投与したところ、投与に関連する免疫毒性を示すエビデンスは認められなかった。

2. ②依存性^57）

   57）日本新薬株式会社 社内資料（承認時評価資料）：依存性試験

   フェンフルラミンはアンフェタミン類似体であり、脳の皮質領域に分布するが、ドーパミン作動性活性がなく、機能観察総合評価及び自発運動量検査では自発運動を刺激しない。
   フェンフルラミンは条件付け場所嗜好性試験で強化因子として働かず、動物はフェンフルラミンを自己投与しない。さらに、フェンフルラミンの内受容性シグナルは、アンフェタミンやコカインなどの他の覚せい剤に当てはまらない。

3. ③光毒性^58）

   58）日本新薬株式会社 社内資料（承認時評価資料）：光毒性試験

   フェンフルラミンは290～700nmの範囲の光を吸収しない。フェンフルラミン及びノルフェンフルラミンのin vitroでのメラニン結合率（平均値±標準偏差）は5.5±2.0％及び12.0±6.0％であり、メラニン低結合の比較対照薬ピルフィニドは1.1±4.3％、中結合の比較対照薬8-メトキシソラレンは47.4±2.9％であった。フェンフルラミンの広範囲な臨床使用、in vitro試験でフェンフルラミン及びノルフェンフルラミンは光反応性あるいは光毒性を示さなかった。